一、验证方法

　　1、化学指示剂法：使用化学指示卡，其在高压蒸气灭菌时，颜色会发生变化。如121℃压力蒸气灭菌化学指示卡，由淡黄色变为黑色，通过颜色变化的深浅与对照色对比，可判断灭菌效果是否达到要求。

　　2、留点温度计法：使用0—150℃的留点温度计，将其放入敞口试管中，再放置在高压灭菌器的不同位置，如蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间等位置。检测前需将温度计的水银柱甩至40℃以下，每次监测后留点温度计的温差应在1℃之间，说明灭菌器内的温度分布均匀。

　　3、生物指示剂法：常用嗜热脂肪芽胞杆菌纸片，将其放入密封试管中，放置在高压灭菌器的不同位置。灭菌后，在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明芽胞未全部灭活；如培养基颜色不变仍为紫色，则说明芽胞已灭活。

　　4、热电偶法：使用校准的无线热电偶进行温度检测。在空载热分布试验中，将多个无线热电偶放置在高压灭菌锅腔室内的不同部位，按设备的标准操作规程进行一个灭菌程序的运行，检测实际温度是否均大于121℃，并确认温度冷点和最高点位置。在满载热穿透试验中，采用满载状态，将无线热电偶放置在待灭菌物品中及腔室内的不同部位，运行灭菌程序，检测实际温度是否均大于121℃。

　　二、验证步骤

　　1、安装鉴定（IQ）：验证高压灭菌器的安装是否正确。

　　2、运行鉴定（OQ）：确保高压灭菌器在规定的参数范围内运行。

　　3、性能鉴定（PQ）：确认高压灭菌器在实际条件下是否能持续实现灭菌。包括空载热分布和满载热穿透力验证，每种验证需重复三次，共做六次。

　　三、验证标准

　　1、温度范围：一般要求灭菌器在运行过程中，腔室内的温度范围相对于实际设定点为-0/+3℃。

　　2、温度均匀性：在空载热分布试验和满载热穿透试验中，多点温度巡检仪检测实际温度均大于121℃且最高与最低温度的差值≤4℃。

　　3、微生物灭活：通过生物指示剂法验证，灭菌后的菌片在培养基中培养后，培养基颜色不变仍为紫色，说明芽胞已灭活。

　　四、注意事项

　　1、验证过程中需确保所使用的温度计、热电偶等设备已校准合格。

　　2、在进行微生物挑战试验时，要严格无菌操作，避免污染。

　　3、不同类型的高压灭菌器和不同的灭菌物品，可能需要根据具体情况进行适当的调整和优化验证方法。