高压灭菌是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌。在密闭的容器中，水的沸点因为蒸汽压力增大而升高，从而提高蒸汽的温度，用来进行有效灭菌。由于微生物细胞蛋白质在湿热情况下更容易凝固，因此在相同的温度下，湿热的杀菌效果比干热杀菌更好，同时湿热的穿透力也更强。
 

　　二、高压灭菌器的分类

　　高压灭菌器主要分为两大类：下排式压力蒸汽灭菌器和预真空压力蒸汽灭菌器。

　　- 下排式压力蒸汽灭菌器：包括手提式和卧式两种。通过热蒸汽压迫使冷空气从底部排气孔排出，当压力达到103 kPa至137 kPa时，温度可达121.3℃至126.2℃，通常15至30分钟即可达到灭菌目的。

　　- 预真空压力蒸汽灭菌器：配有空气抽真空泵，在通入蒸汽前先将内部抽成真空，形成负压，使蒸汽更容易穿透。在压力206 kPa、温度达132℃时，4至5分钟即可完成灭菌。
 

　　三、高压灭菌器的使用方法

　　1、手提式高压蒸汽灭菌器

　　- 使用方法：在锅内加入适量的水，将灭菌物品放入灭菌器内，盖好锅盖并拧紧螺丝。打开排气阀，加热至沸腾后维持10至15分钟排尽冷空气，然后关闭排气阀，使压力升至103 kPa，温度达到121.3℃，维持30分钟。停止加热，待压力表降至“0”且温度降至100℃以下后，打开排气阀，慢慢开盖。

　　- 注意事项：切勿在压力和温度较高时打开排气阀，以免引起培养基剧烈沸腾冲出管口或瓶口，污染培养基。

　　2、卧式高压蒸汽灭菌器

　　- 使用方法：关闭排水阀，调整总阀至“全排”，打开进水阀，待水距水表顶端5mm至10mm处，关闭进水阀。装入物品后，当夹层压力表达到灭菌需要的压力时，将套层中的蒸汽导入消毒室进行灭菌。消毒完毕后，根据物品类型选择合适的排气方式。

　　- 注意事项：对操作人员要求高，需经过专业培训。

　　3、全自动高压蒸汽灭菌器

　　- 使用方法：接通电源，注入加热用水，放入灭菌物品。关闭盖子后，在控制板上选择所需的灭菌程序，设定灭菌的温度和时间，按下“开始”键。灭菌完毕后，灭菌器内的温度降至设定温度，控制杆锁自动打开。

　　- 注意事项：防止多次使用加热用水，以免腐蚀灭菌器箱壁和管道堵塞。
 

　　四、高压灭菌应注意的问题

　　- 灭菌包不宜过大过紧，灭菌器内物品的放置总量不应超过灭菌器柜室容积的85%。

　　- 盛装物品的贮槽或盒应有通气孔，若无孔，应将容器盖打开。

　　- 布类物品应放在金属、搪瓷类物品之上，避免蒸汽遇冷凝成水珠，影响灭菌效果。

　　- 注意安全操作，每次灭菌前检查灭菌器是否处于良好工作状态。

　　- 灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归“0”位后才可打开盖或门。
 

　　五、高压灭菌效果的测定

　　1、化学指示剂法

　　利用化学指示剂在一定温度与作用时间下受热变色或变形的特性来判断是否达到需要的灭菌参数。例如，3M压力灭菌指示胶带在121℃持续20分钟或130℃持续4分钟后，胶带上的白色指示线条会全部变黑。

　　2、留点温度计法

　　利用水银温度计不回流的特性，可以指示灭菌器在灭菌过程中达到的最高温度。此法只能验证温度，不能指示灭菌时间是否达到要求。

　　3、自制测温管法

　　利用一些化学药品受热熔化后再冷却，晶体的外形不同的特性来判断温度是否达标。例如，苯甲酸的熔点为121-123℃，与灭菌器的灭菌温度基本吻合。

　　4、生物指示剂法

　　利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌，来测定热力灭菌的效果。灭菌后取指示剂接种到培养基中，若培养基澄清、颜色没有变化即说明芽孢被杀死，灭菌效果良好。